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Pipeta graduada

Autores: Ana Carolina Moulatlet

PORTAL LABIQ

Medidas de Volume - Pipeta Volumétrica

Procedimento de utilização da pipeta volumétrica.

Medidas de Volume - Pipeta Graduada

Procedimento de utilização da pipeta graduada.

Operação da Pera

Procedimento de operação da pera para sucção e escoamento de líquidos.

Escoamento Manual

Procedimento para o controle manual do escoamento em pipetas.

Auto-play - ligado

Introdução

As pipetas graduadas são utilizadas para transferir volumes variados. Consistem de um tubo de vidro estreito graduado em mililitros, podem ter capacidade de, por exemplo, 0,5mL., 1mL, 2mL, 5mL, 10mL, 20mL, 25mL. As pipetas graduadas podem ser instrumentos classe A/AS, que apresentam alta exatidão em medidas feitas a temperatura de 20°C - temperatura padrão de calibração do equipamento ou classe B, menos exatas que as de classe A/AS (dobro do erro é permitido). Podem ser feitas em vidro ou em plástico. São calibradas por vertido (TD, Ex), ou seja, para dar escoamento a determinados volumes, sendo que a quantidade de líquido vertido do instrumento corresponde ao volume impresso no instrumento, ou a conter (TC, In), ou seja, calibrados para conter um volume líquido, sendo que a quantidade de líquido contido no instrumento corresponde ao volume impresso no instrumento. O tempo de espera para escoamento do líquido pode ser nulo ou de 5s, apresentando este último limite de erro menor.

As graduações nas pipetas graduadas estão na extremidade superior. O primeiro número mostra o volume total da pipeta e os dois números seguintes referem-se à escala. Por exemplo: 5 in 1/10 significa que o volume total da pipeta é de 5mL e sua escala é de 0,1mL.

As pipetas graduadas A/AS podem também ser do tipo 1, 2 ou 3, sendo as a do tipo 1 de esgotamento parcial (calibradas para que nem todo o volume seja escoado) e ponto zero no topo, e as do tipo 2 e 3, ambas de esgotamento total (calibradas para que todo o conteúdo escoe da pipeta), porém a 2 com volume nominal no topo e a 3 com ponto zero no topo. A localização do ponto zero tem importância quando se transfere volumes parciais. Para as pipetas de tipo 2 é necessário apenas ajustar uma vez o menisco no volume que se quer transferir. Para as pipetas do tipo 1 e 3 é recomendado ajustar o menisco primeiro no valor zero e depois deixar escoar o líquido até o volume de interesse, ajustando novamente o menisco.

As pipetas graduadas de vidro podem ser reutilizáveis, podendo ser aquecidas em estufa de secagem ou de esterilização até 250°C, não provocando variação de volume. No entanto, um aquecimento irregular ou uma mudança brusca de temperatura provocam tensões térmicas que podem levar à quebra do vidro. Já as pipetas de plástico (polipropileno) translúcido podem ser expostas a temperaturas de 60°C sem que haja variações de volume que ultrapassem permanentemente o limite de erro. No entanto, é recomendado que a temperatura de limpeza não exceda 60°C, evitando que a graduação seja apagada.

Princípio da técnica

A transferência de líquido de volumes conhecidos consiste em fazer a sucção do líquido, ajustar o menisco na marca de calibração, e posteriormente deixar escoar o líquido em outro recipiente. A sucção deve ser feita com auxílio de uma pera de sucção.

A pera de sucção gera uma pressão diferente da atmosférica (fecha o sistema e apresenta válvulas que permitam a retirada de ar de seu interior), que facilita a subida do líquido. Para que o líquido escoa, é necessário que o sistema seja aberto.

Aparato experimental

O aparato experimental para a transferência de volumes variados consiste dos seguintes componentes:

Pipeta graduada (ou pipeta cilíndrica)

Pera de sucção (ou pipetador)

Procedimento

Acople a pera de sucção na extremidade superior da pipeta volumétrica (extremidade mais próxima da marca de calibração). Permita que o líquido suba até um pouco acima da marca de calibração. Descarte uma ou duas vezes o volume da pipeta para lavar e retirar traços de outros líquidos transferidos com o equipamento.

Depois de lavada a pipeta, permita que o líquido suba até um pouco mais que a marca de calibração. Baixe a solução até o menisco na marca de calibração. Leve a pipeta até o recipiente em que o líquido deverá ser escoado. Mantenha a pipeta levemente inclinada (o mais próximo possível da vertical), encoste a parte inferior da pipeta na parede do recipiente e deixa o líquido escoar até que pare. Traga a pipeta agora para a posição vertical e aguarde mais alguns segundos até que o líquido escoe totalmente. As últimas gotas geralmente não escoam da pipeta e não devem ser sopradas.

Uma forma alternativa de permitir o escoamento do líquido da pipeta é retirar a pera de sucção e possibilitar o escoamento por gravidade. Para isso, acople a pera de sucção e permita que o líquido ultrapasse um pouco a marca de calibração. Retire a pera e rapidamente com o dedo indicador tampe a extremidade superior da pipeta. Permita que a solução escoe até o menisco destampando parcialmente a pipeta. Leve a pipeta até o recipiente onde o líquido será escoado e proceda como acima, retirando apenas o dedo da extremidade superior da pipeta.

Cuidados técnicos

Ao montar o aparato, verifique se a pera de sucção está bem acoplada. Não aperte forte demais para não quebrar o vidro.

Nunca fazer a sucção com a boca.

Cuidado ao levar a pipeta ao recipiente para onde o líquido será transferido para não bater a ponta da pipeta e quebrá-la.

Ao fazer esse caminho, mantenha a pipeta na posição vertical. Assim, evita-se que o líquido entre na pera de sucção.

A leitura de volume de líquidos claros deve ser feita pela parte inferior do menisco e a de líquidos escuros pela parte superior.

Logo depois de feita a transferência do líquido, lave a pipeta com água destilada ou deixe-a mergulhada em água até que possa lavá-la. Assim evita-se que a solução seque dentro da pipeta e deixe resíduos, tornando mais difícil sua limpeza.

Evite lavar com soluções básicas, pois são capazes de atacar o vidro. Uma solução de 5% (em massa) de NaOH, a 95°C, dissolve o vidro Pyrex a uma taxa de 9µm/h.

Cuidados com a segurança

Use o EPI: óculos de segurança, avental, luvas e calçados fechados.

Telefone

+55 (11) 3091-3845

Endereço

Instituto de Química - USP

Av. Prof. Lineu Prestes, 748, Bl. 03 sup. Sl. 0357

Butantã, São Paulo, SP, Brasil

CEP: 05508-000

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